[CeReN ✓]

Molekuler biyolojinin merkezi dogmasinin temel adimi, mRNA’nin DNA’dan bilgi tasimasi ve protein sentez mekanizmalarina aktarilmasidir. Insan vucudunun hemen hemen her islevi (normal ve hastalikla ilgili) farkli proteinler tarafindan gerceklestirildiginden, protein molekulleri cok onemlidir. Ilginc bir sekilde, mRNA, DNA ile esit derecede olmalidir, cunku mRNA mevcut degilse insan vucudu genetik kodu asla kullanmaz veya proteinler asla sentezlenmez. Ayrica, insan vucudunun normal fizyolojik isleyisi, terapotik proteinlerin asagi regulasyonu veya proteinlerle iliskili hastaliklarin yukari regulasyonu ve yabanci proteinlerin girisi hastalik durumuna yol acar. Farkli proteinlerle iliskili onemli fonksiyonel rol, nihayetinde protein hedefli ilaclarin veya tedavilerin gelistirilmesine yonelik ipuclari verir.


Protein hedeflemedeki cesitli zorluklar nedeniyle, arastirmacilar DNA tabanli gen terapisine gecmislerdir. Bununla birlikte, genom entegrasyonunun ve gecici doganin guduk olasiligi, kliniklerde kullanimini zorlastirmaktadir. Ote yandan mRNA, bu iki ana tuzagin (hedefleme ve genom entegrasyonu) ustesinden gelen ve geleneksel gen terapisi stratejilerine guclu bir alternatif olarak ortaya cikan bir molekuldur. Ek olarak, tum post-translasyonel modifikasyonlarla uygun sekilde katlanmis olgun terapotik proteini geri getiren protein sentezi icin dogal veya buyuyen hucre mekanizmalarini kullanir, boylece rekombinant proteinlere gore daha iyi firsatlar sunar. MRNA terapilerine dayali tedavi stratejileri, spesifik mRNA sekanslarinin hastanin vucuduna uygulanmasini ve hastaligin ilerlemesine dahil olan spesifik proteinleri sentezlemek icin hucresel mekanizmanin kullanilmasini icerir. Bu yontem, asagi regulasyonu hastalikla iliskili olan spesifik proteinleri asiri eksprese etmek icin kullanilabildiginden ve spesifik antijenlerin ekspresyonunu indukler. Bu nedenle antijenik bir yanit ortaya cikarmak icin kullanilabildiginden bircok durumda uygulanabilir.MRNA Platformlari ve Akciger Kanseri Tedavisinde (LC) MRNA Asilari


Bununla birlikte, ilk calismalar, in vitro kopyalanmis ve sentezlenmis mRNA molekullerinin nukleazlara kolayca erisilebildiklerinden ve toll benzeri reseptorler (TLR’ler) tarafindan kolayca tespit edildiklerinden ve dogustan gelen immun yaniti olusturan dendritik hucreleri (DC’ler) aktive ettiklerinden daha az kararli olduklarini ileri surulmustur. Kariko ve ekibi tarafindan yapilan bir calismada, sentetik mRNA’larla iliskili immunojenik yanitlari anlamak icin arastirmacilar, RNA nukleositlerinde cesitli modifikasyonlari dahil etmislerdir. Memeli RNA nukleositlerinin modifikasyonunun, bu modifiye mRNA’lara maruz kalan immunomodulator sinyalleri, DC’lerin, maruz kalan DC’lere kiyasla aktivasyonu ve sitokin uretimini azalttigi bulunmustur. Bu ayni zamanda insan vucudunun bakteriyel veya diger yabanci memeli olmayan RNA’lara dogustan gelen bagisIklik tepkisi tarafindan kullanilan bir savunma mekanizmasidir. Bu organizmalar, hucreleri ve DC’leri eksprese eden TLR’leri potansiyel olarak aktive eden daha az miktarda modifiye nukleosit icerir. Bu nedenle nukleositlerdeki modifikasyonlar, DC’lerin RNA aracili aktivasyonunun ustesinden gelir. Bu yaklasim, mRNA tabanli tedavilerin tasarimini ve gelistirilmesini potansiyel olarak etkileyebilir.


RNA molekulleri sentezlerinin ardindan hucrelerde stabilitelerini, dagilimlarini ve diger transkripsiyon sonrasi olaylari etkileyen 150’den fazla farkli kimyasal modifikasyona ugrayabilir. Ayrica toplu olarak, bu modifikasyonlar epitranscriptome veya RNA epigenetik modifikasyonlari olarak bilinir. Yaygin olarak modifiye edilmis mRNA nukleositlerinden bazilari N6-metiladenosin (m6A), 5-metilsitidin (m5C), N7-metilguanosin (m7G), psodouridin (s2U), inosin ve bircok -O-metillenmis nukleosittir. Her kimyasal modifikasyon, m6A mRNA donusumunu arttirir, embriyonik kok hucre gelisimini duzenler, RNA bozunmasini destekler, mRNA oncesi birlestirme, adipogenez ve prostat kanseri kemik metastazi gibi spesifik bir rol oynar. Benzer sekilde s2U, RNA’nin yapisini duzenler, stabiliteyi arttirir ve ceviri verimliligini degistirirken, m5C kodonun yeniden baglanmasini indukler ve diger modifikasyonlarla kombinasyon halinde miRNA hedeflemesine rehberlik eder.
Ceviri icin ribozomlar, baslangic kodonunu belirlemek icin Kozak dizileri icinde 5 UTR’de mRNA transkriptlerini tarar. Ancak 5 UTR uzunlugu, cis elementlerin varligi ve m6A ribozom taramasini module eder ve son olarak translasyonel verimliligi duzenler. Ilginc bir sekilde, 5 ‘UTR’lerinde m6A’yi tutan bazi transkriptler, 5’ UTR m6A’nin okaryotik baslatma faktoru 3 (eIF3) ile dogrudan baglanmasi nedeniyle 5 ‘basliktan bagimsiz bir sekilde cevrilebilir. Adenozinde N6-metilasyonun inhibisyonu spesifik olarak 5’UTR m6A’dan olusan mRNA transkriptlerinin cevirisini azaltir. Kapaktan bagimsiz translasyon mekanizmasi, isi soku proteini 70 (Hsp70) mRNA icin calisildi ve hucresel stresin, transkriptom Hsp70’te m6A’nin global bir yeniden duzenlenmesini indukledigi ve 5 ‘UTR’de m6A ile daha fazla mRNA olusturdugu gozlemlenmistir. Bu nedenle, 5 ‘UTR’deki m6A, 5’ baslik baglayici proteinlerin bagimliligini atlayarak stres kosullari altinda mRNA’yi cevirmeye yardimci olur. Bu tur RNA modifikasyonlarinin terapotik RNA’lar ve mRNA’lar tasarlanirken ve optimize edilirken dahil edilebilecegini gosterir.


RNA tabanli tedavilerin cesitli uygulamalari ve kliniklere donusme potansiyeli ile sentetik mRNA’lar guclu bir arac ve geleneksel tedavilere veya asilara alternatif olarak ortaya cikmistir. Son yillarda, immun onkoloji, protein replasman tedavileri ve asi gelistirme icin mRNA bazli terapotikler gelistirmek icin onemli ilerleme saglanmistir. Gercekten de, Pfizer ve Moderna tarafindan gelistirilen mRNA temelli asi formulasyonlari gelistirilmis ve agir akut solunum yolu sendromu koronavirus 2 (SARS CoV-2) kuresel salgin neden mucadele koronavirus hastaligi 2019 da (COVID-19) kayit suresi onaylanmistir. Bu asilarin basarili guvenlik ve etkililik sonuclari muhtemelen sevk ve guveni artiracak ve genel olarak RNA bazli terapotiklerin gelecekteki seyrini belirleyecektir. Melanom son mRNA dayali kanser asisi calismalarina gore, COVID-19 mRNA bazli asi gibi ve diger enfeksiyonlar, mRNA tabanli LC asilari icin gelisim yol haritasi belirlenmistir.
MRNA tabanli LC asi gelistirme icin sematik cizimler vardir. MRNA asisi gelistirmenin amaci, potansiyel tumore ozgu antijenler i tanimlamak icin LC dokusu ve normal dokunun ekzomunun karsilastirmali bir analizi ile baslatilmistir. Yuksek verimli yontemlerle birlestirilen ayrintili analiz, LC’ye ozgu tanimlanmis antijenler ve neoantijenler in dogrulanmasini saglar. Tumor antijenlerine ozgu mRNA dizileri, daha sonra sentezlenir, modifiye edilir ve mRNA transkripsiyonu icin uygun plazmitlere klonlanir. LC’ye ozgu antijenleri kodlayan nihai, optimize edilmis mRNA’larin lipozom formulasyonlari veya diger uygun araclar, LC tumorlerinin yok edilmesi icin belirgin bir antikanser immun tepkisi ortaya cikarmak icin LC hastalarina enjekte edilir.


LC’de mRNA Asilari
MRNA Platformlari ve Akciger Kanseri Tedavisinde (LC) MRNA AsilariKanser asilarinin birincil amaci, kansere ozgu bagisIkligi ortaya cikarmak veya artirmaktir. Tumor antijenleri, kanser immun yanitini tetikler ve potansiyel tumor antijenlerinin tanimlanmasi ve formulasyonu zorlu bir gorevdir. Antijen formulasyonu baglaminda, mRNA tabanli yaklasimlar, konakci ve hastanin hucre ici mekanizmasini kullanarak antijenleri tasarlamak ve sentezlemek icin umut verici bir yol saglar. DC’ler, ayni kokenli T hucre reseptorlerini (TCR’ler) kucaklamak, tumor bagisIkligini ve immunolojik bellegi induklemek icin tumor antijenik peptitleri sunar. Kanser asilarinin ana hedefleri arasinda tumorle iliskili antijenler (TAA) ve kanser neoantijenleri bulunur. Normal dokulara kiyasla asiri ekspresyon, farkli hucre alti lokalizasyonu, tumore ozgu ekspresyon gibi tumorlerin atipik eksprese edilen proteinleri TAA’yi olusturur. BagisIklik kontrol noktasi blokajinin son basarisi ve Melanomda RNA asisinin ilk basarisi, arastirmacilarin RNA tabanli kanser asilarina olan ilgiyi arttirmisti.MRNA Platformlari ve Akciger Kanseri Tedavisinde (LC) MRNA Asilari


RNA bazli asilar, geleneksel asilar icin umit verici bir ikame olarak ortaya cikmistir. Shahin ve ekibi tarafindan baslatilan, intravenoz olarak uygulanan lipozomal RNA (RNA-LPX) asisinin cok merkezli, acik etiketli, doz artirma faz 1 klinik denemesinin (NCT02410733) yakin zamandaki ara sonuclari, melanomda asi bu mRNA bazli immunojenik potansiyeli gostermistir. Kanser asisi alani gelisme asamasindadir ve ozellikle LC icin yalnizca birkac calisma mevcuttur. Evre IV KHDAK hastalarini iceren bir klinik calisma, Ozofagus Skuamoz Hucreli Karsinom-1 (NY-ESO- 1), MAGE-C1, MAGE-C2, survivin, 5T4 ve Mucin-1), lokal radyasyon tedavisi ile kombinasyon halinde hedeflenen immun yanitlari induklemek icin arastirilmistir.
Tedavi, kucuk yan etkilerle iyi tolere edilmistir ve BI1361849, cogu hastada antijene ozgu immun yanitlari artirmistir. Boylece antijene ozgu antikor duzeyleri ve fonksiyonel T hucreleri, hastalarin sirasiyla % 80 ve % 40 artmis, bu da ileri klinik arastirmalari desteklemistir. Benzer sekilde, baska bir faz I / IIa calismasi da CV9201’in iyi tolere edildigini ve evre IIIB / IV KHDAK hastalarinda bagisIklik yanitini artirdigini gostermistir. Bu sonuclar, NSCLC’de immun kontrol noktasi inhibitorleri ile kombinasyonlarda mRNA bazli immunoterapinin onemini gostermektedir. Benzer sekilde, devam eden bir faz I / II calismasi (NCT03164772), kontrol noktasi inhibitorleri, KHDAK tedavisi icin anti-PD-L1 (durvalumab) ve anti-CTLA-4 (tremelimumab) kombinasyonunda mRNA asisinin (BI 1361849) etkinligini ve guvenligini degerlendirmektedir.

ALİNTİ ~